鲤鱼浮肿病的防控技术要点
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时间：2022-10-13
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鲤鱼浮肿病毒病，又称锦鲤睡眠病，是鲤鱼和观赏锦鲤的一种重要急性传染病，发病的鱼死亡率可达80-100%。自1970年日本首次报道以来，该病已蔓延到英国、法国、荷兰、德国、意大利、捷克、奥地利、波兰和印度等国，该病的病原为鲤鱼浮肿病毒（CEV），目前已进入中国。有文献报道目前养殖鲤、锦鲤的病毒阳性率较高，亟需加强该病原的监测、防控。
二、病原及检测方法
鲤鱼浮肿病毒（CEV）又名鲤痘病毒，隶属痘病毒科，病毒大小约200nm×400nm，有囊膜，基因组为双链DNA。对普通去污剂、氯仿、氧化剂等敏感，感染的靶器官为鳃、眼球、肾脏和皮肤等。CEV一般感染鲤、锦鲤，偶尔可感染金鱼，不同规格的鱼均对CEV敏感，可通过直接接触、摄食、水、饵料、鸟类等传播，其病程一般为7-10天。由于其造成的危害，2016年亚太水产养殖网络中心在AGM会议上，正式提出将该病列入亚太区域水生动物疫病监测名录。
检测该病原取病鱼腮或肾组织抽提DNA做nested-PCR扩增。第一次PCR扩增：正向引物F1：5'-ATGGAGTATCCAAAGTACTTAG-3';反向引物R1：5'-CTCTTCACTATTGTGACTTTG-3’,扩增528bp的片段；第二次扩增：正向引物F2：5’-GTTATCAATGAAATTTGTGTATTG-3’，反向引物R2：5’-TAGCAAAGTACTACCTCATCC-3’，扩增478bp的片段。反应体系（50 mL）为2×预混合液（2×master mix）25 mL，引物F1、R1各2 mL，模板5 mL，DEPC水补至50 mL。第一次和第二次扩增的反应条件均为95 ℃预变性4 min，95 ℃变性1 min，55 ℃退火1 min，72 ℃延伸1 min，35个循环后72 ℃再延伸10 min。
三、临床症状及发病温度
患病鱼表现为呈昏睡状或聚集在水面下或躺在鱼池底部，并在随后的2周内死亡，主要症状为身体浮肿、眼球内陷、鳃肿胀增生、尾鳍充血和肛门红肿，此外，鱼体分泌的粘液很容易被擦掉，从而露出粗糙的鳞片，解剖可见肾脏糜烂、肠道质地变脆等，文献报道的发病温度一般为7-27°C。人工感染实验表明，24℃条件下感染鲤鱼在第三天出现嗜睡症状，第5天大多数鲤鱼即出现典型的临床症状。第6天开始出现死亡，第8-10天出现死亡高峰，12天内死亡率达100%。
四、防控技术要点
1、加强引进鱼种的CEV检测。目前对于CEV的感染没有有效的治疗方法，因此使用分子生物学手段对鱼种进行CEV检测，对及时发现CEV携带并切断其传播至关重要。目前已经建立的快速检测方法包括nested-PCR检测法、环介导等温扩增（LAMP）检测法、RAA-LFD检测法和荧光定量PCR检测法等。其中nested-PCR检测法是目前较为稳定，且适用于大批量检测的方法。
2、避免鲤鱼、锦鲤和金鱼混养。目前的研究表明CEV的易感宿主包括鲤、锦鲤和金鱼，因此在这些鱼的养殖池中再引入易感鱼种，会有带入病原的风险，由于CEV对环境的耐受性较高，在水中扩散能力较强，稍有不慎，即可对养殖池及周边水域造成发病风险。
3、换池操作尽量保持水温一致。已有发病案例表明，将鱼种从温度较高的水体放入温度较低的水体时，容易造成该病的急性暴发，可能与鱼体应激导致免疫力降低有关。
4、有条件的养殖池可用升高水温的方法进行应急治疗。人工感染实验表明，在28℃条件下，感染鲤鱼5天后出现轻微的症状，14天内死亡率为27%，表明温度是影响CEV感染发病和死亡率的重要因素，水温的升高可有效降低患病鱼的死亡率。
5、做好发病池的隔离。一旦发生病害，要将病死鱼作无害化处理。对发病鱼池使用的器械等进行彻底消毒，禁止将池水排放入公共水域，防止病原向周边传播蔓延。
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