鱼类寄生虫之分类鉴定描述

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白洋淀是我国２６个重点湖泊之一，在华北地区具有重要的生态价值。近年来白洋淀水产养殖业发展迅速，２００８年养殖面积超过４０００ｈｍ２［１］，在河北省占有重要地位。但淀区水质污染及患病鱼苗、鱼种的引入，导致养殖和野生鱼类寄生虫疾病严重，给当地的水产养殖业带来严重损失，对水生动物资源也带来了不利影响。２００９年４月—２０１０年１０月，笔者对白洋淀水生动物寄生虫区系调查的结果显示，原生动物种类占寄生虫种类的６３％，其中纤毛动物门车轮虫科危害较大，宿主广泛，被调查的所有鱼类均有寄生［２］，因此对车轮虫科分类、种群动态和药物防治进行了重点研究。

车轮虫科是水产养殖常见的危害性纤毛虫类群之一，可自由运动，广泛寄生于各种淡、海水动物的体表、鳃等部位［３］，可不同程度地给宿主造成危害。鱼类车轮虫主要危害体长约３ｃｍ的幼鱼，当其严重感染时会影响鱼类的正常呼吸，影响鱼的健康生长，引起鱼类大批死亡［４］。车轮虫病一般出现在水较浅，面积小不流动的水体和鱼类密集养殖的池塘中。全年均有可能发病，在每年的春夏两季达到高峰。近年来车轮虫对白洋淀地区水产养殖业造成了较大影响，是寄生虫病中的一大危害［５］。车轮虫属（Ｔｒｉｃｈｏｄｉｎａ）是车轮虫科种数最多的属，国际上车轮虫属已有超过２００种的有效记录种，我国发现近７０种［６］。笔者对白洋淀地区鱼类外寄生车轮虫属进行分类描述，有助于阐明该地区寄生车轮虫区系组成，对病原（车轮虫）早期的准确诊断也有助于有效预防和控制该地区车轮虫病的发生，对其他地区相关研究和车轮虫病的控制也有一定借鉴作用。

１　材料与方法

１．１　材料

２００９年４月—２０１０年１０月（除冬季结冰期外）的每月中旬从白洋淀采集鱼类，参考《河北省鱼类》［７］对鱼类进行鉴定，镜检判断寄生虫类别，同时用自制吸管从鱼类的鳃丝部位收集车轮虫［８］，为鉴定种类做准备。

１．２　染色和鉴定方法

采用宋微波等［９］提出的新改良的干银染色法显示车轮虫的附着盘结构。利用吉姆萨染色法［１０］显示车轮虫细胞核的形态。数据记录模式及种类鉴定依据Ｌｏｍ［１１］的“统一特定方法”和Ｖａｎ等［１２］的齿体定位描述法进行。使用奥林巴斯ＢＸ－５１显微镜镜检，并用Ｃａｎｏｎ　ＥＯＳ　４５０Ｄ数码相机拍照，采用Ｃｏｒｅｌ　ＤＲＡＷ　１１．０软件绘制齿体定位图［１３］。

２　结果与讨论

车轮虫的分类地位：寡膜纲、缘毛目、游走亚目、车轮虫科、车轮虫属。属的特征：齿体具有发达的齿钩、齿锥和齿棘，口围绕度约３６０°～５４０°。

２．１　显著车轮虫 （Ｔ．ｎｏｂｉｌｌｉｓ）

采集时间及地点：２００９年７月和１０月，采自白洋淀。宿主：波氏吻鱼叚虎鱼（Ｃｔｅｎｏｇｏｂｉｕｓ　ｃｌｉｆｆｏｒｄｐｏ－ｐｅｉ）。

形态描述（图１ａ、图２ａ）：大型淡水车轮虫，宿主广泛。活体侧面观呈扁平碟状。干银染色标本显示其齿钩呈银杏叶状，外切缘平滑。前后缘上部呈一定角度、下部平行。齿钩连接纤细，齿钩前缘超过１／２ＹＹ＋１轴。具有钩突，无后突起。齿锥比较发达，其顶点通常与Ｙ－１轴相切，齿锥之间相互嵌合较紧密。齿棘细长，向前弯曲，顶点尖锐，超过Ｙ＋１轴，部分具有棘突。干银染色标本测量：标本量为６。虫体 直径８０．０～８５．０μｍ，平均 （８２．３±６．３）μｍ，附着盘直径７０．０～７４．０μｍ，平均（７２．０±４．０）μｍ，齿环直径４４．０～４７．０μｍ，平均（４５．３±２．３）μｍ，缘膜宽５．０～７．０μｍ，平均 （６．０±１．０）μｍ。辐线数１１条，齿体数２９～３３个，齿体纵长２６．０～２９．０μｍ，平均 （２７．０±３．０）μｍ，齿钩长８．０～１０．０μｍ，平均（９．０±１．０）μｍ，齿锥宽５．０～６．０μｍ，平均 （５．３±０．３）μｍ，齿棘长１２．５～１３．０μｍ，平均 （１２．８±０．１）μｍ；口围绕度３９０°～４００°。

吉姆萨染色标本：无。活体大核为“Ｕ”形，小核未见。与陈启鎏［１４］报道的种类相比较，形态结构和统计学数据均相吻合，故确定为显著车轮虫。显著车轮虫寄生比较广泛，已报道的宿主有鲫鱼（Ｃａｒａｓ－ｓｉｕｓ　ａｕｒａｔｕｓ）、翘嘴红鲌（Ｅｒｙｔｈｒｏｃｕｌｔｅｒ　ｉｌｉｓｈａｅｆｏｒ－ｍｉｓ）、青梢红鲌（Ｅ．ｄａｂｒｙｉ）等，波氏吻鱼叚虎鱼是显著车轮虫的新宿主记录。

２．２　拟黑色车轮虫（Ｔ．ｐａｒａｎｉｇｒａ）

采集时间及地点：２０１０年８月，采自白洋淀。宿主：波氏吻鱼叚虎鱼。

形态描述（图１ｂ，图１ｃ；图２ｂ，图２ｃ）：大型车轮虫，寄生广泛。活体侧面观呈圆帽狀。干银染色标本显示其齿钩呈长四边形。外切缘平滑与缘膜平行，前后缘平滑。未见钩突和后突起，骨突尖锐。齿钩连接较纤细，齿钩通常超过Ｙ＋１轴。齿锥发达，顶点通常超过Ｙ－１轴，齿锥之间嵌合较紧密。齿棘细长，一般与Ｙ轴平行或略向前弯曲。顶点尖锐，落于Ｙ轴或略超过Ｙ轴，未见棘突。干银染色标本测量：标本量为９。虫体直径５４．０～６５．０μｍ，平均 （５８．０±４．３）μｍ，附着盘直径４４．０～５３．０μｍ，平均（４７．８±３．３）μｍ，齿环直径２５．０～３５．０μｍ，平均（２８．３±１．３）μｍ，缘膜宽５．０～６．０μｍ，平均（５．２±０．９）μｍ，辐线数７～８条；齿体数２５～３０个；齿体纵长１５．０～１７．０μｍ，平均（１５．８±１．３）μｍ，齿钩长５．０～８．０μｍ，平均（７．２±０．１）μｍ，齿锥宽１．０～２．０μｍ，平均（１．８±０．３）μｍ，齿棘长７．０～８．０μｍ，平均（７．９±０．１）μｍ；口围绕度３８０°～４００°。

吉姆萨染色标本：大核马蹄形，外径约４６．０μｍ，内径约２９．０μｍ，口径约１１．０μｍ，未见小核。本种与唐发辉等［１５］记录的种类相比较，形态结构相吻合，统计学数据也位于其范围内，故确定为拟黑色车轮虫。波氏吻鱼叚虎鱼为新宿主记录。

２．３　网状车轮虫 （Ｔ．ｒｅｔｉｃｕｌａｔｅ）

采集时间及采集地点：２０１０年６月、８月和１０月，采自白洋淀。宿主：鲫鱼、波氏吻鱼叚虎鱼。

形态描述（图１ｄ，图１ｅ；图２ｄ，图２ｅ）：一种大型淡水车轮虫种类，活体侧面呈圆帽状，一般虫体高度大于虫体直径。干银染色标本显示出虫体中央有１１～１３个大小不一的椭圆形或圆形颗粒分布，部分形状不规则。齿钩较粗大，前后缘与外切缘圆滑，没有明显的分界，前缘超过Ｙ＋１轴。无钩突，齿钩之间相互嵌合较松散。齿锥较发达，无齿锥前突。齿锥顶点钝圆，超过Ｙ轴，不及１／２ＹＹ－１轴。齿棘粗大，顶点钝圆，与齿钩长度相近，无棘突。干银染色标本：标本量为２１。虫体直径４８．０～６５．０μｍ，平均（５９．０±５．５）μｍ，附着盘直径３７．５～５８．０μｍ，平均（４８．８±４．７）μｍ，齿环直径２２．５～３５．０μｍ，平均（２８．６±４．５）μｍ，缘膜宽４．０～７．０μｍ，平均（５．２±０．９）μｍ，辐线数９～１１条。齿体数２１～２９个，齿体纵长１２．５～１７．５μｍ，平均（１４．３±２．１）μｍ，齿钩长５．０～７．５μｍ，平均（５．８±０．６）μｍ，齿锥宽２．５～４．５μｍ，平均（３．５±０．３）μｍ，齿棘长４．０～７．５μｍ，平均（５．４±０．８）μｍ。口围绕度３８０°～３９０°。

吉姆萨染色标本：大核呈马蹄型，外径约５５．０μｍ，内径约４４．０μｍ，口径约１０．０μｍ，未见小核。与Ｌｏｍ［１６］描述的种类相比较，形态结构和统计学数据均较为一致，且网状车轮虫都有一个显著易辨的共同特征，即附着盘中央有８～１６个近圆形或者椭圆形的中央颗粒，故确定为网状车轮虫。网状车轮虫是宿主非常广泛的一种车轮虫，也是存在一定形态变异性的种类。本种是在鲫鱼和波氏吻鱼叚虎鱼上发现的，波氏吻鱼叚虎鱼为新宿主记录。

２．４　杜氏车轮虫 （Ｔ．ｄｏｍｅｒｇｕｅｉ）

采集时间及地点：２０１０年８月，采自白洋淀。宿主：黄黝鱼（Ｈｙｐｓｅｌｅｏｔｒｉｓ　ｓｗｉｎｈｏｎｉｓ）、波氏吻鱼叚虎鱼。

形态描述（图１ｆ；图２ｆ）：活体侧面为扁盘状，干银染色标本显示其附着盘中央有一个大而圆的中央颗粒。齿体整体粗大，前后缘较为平滑，齿钩外切缘圆滑。具有明显钩突，骨突较尖锐。齿钩凸点通常与Ｙ＋１轴相切。齿锥发达，顶点一般超过１／２ＹＹ－１，相邻的齿锥相互紧密嵌合。齿棘粗大，顶点钝圆。部分齿体具棘突。齿棘通常与Ｙ轴平行，有的略斜向前方。

干银染色标本：标本量为６。虫体直径５０．０～６３．０μｍ，平均 （５６．７±３．４）μｍ，附着盘直径４０．０～５３．０μｍ，平均（４５．５±３．５）μｍ，齿环直径２２．０～３０．０μｍ，平均（２６．０±３．８）μｍ，缘膜宽５．０～７．０μｍ，平均（５．６±０．６）μｍ，辐线数８～９条；齿体数１８～２１个，齿 体 纵 长１２．５～１６．０μｍ，平 均（１４３．９±１．８）μｍ，齿钩长４．０～７．０μｍ，平均（５．３±１．４）μｍ，齿锥宽３．０～４．５μｍ，平均（４．０±０．４）μｍ，齿棘长４．０～６．０μｍ，平均（５．０±０．４）μｍ。口围绕度３９０°～４００°。

吉姆萨染色标本：无。与Ｌｏｍ［１７］报道的杜氏车轮虫种群描述较为一致。且本种明显的鉴定特征是附着盘中央具大而圆的颗粒，故确定该种为杜氏车轮虫。黄黝鱼和波氏吻鱼叚虎鱼为杜氏车轮虫的新宿主记录。

２．５　异齿车轮虫（Ｔ．ｈｅｔｅｒｏｄｅｎｔａｔａ）

采集时间及地点：２０１０年８月，采自白洋淀。

宿主：黄黝鱼。

形态描述（图１ｇ；图２ｇ，图２ｈ）：大型淡水车轮虫，侧面观为帽状。干银法标本显示其附着盘中央无颗粒。齿钩宽阔，外切缘圆滑、与缘膜不平行。前后缘均较圆滑，具明显的钩突。齿钩凸点高于凹点，凸点通常超过Ｙ＋１轴。骨突较尖锐。齿锥发达，圆滑的顶点紧密相嵌于下一齿体，通常超过ｌ／２ＹＹ－１。齿棘发达但不光滑，具尖锐的且向后倾斜的顶点，棘突明显。

干银染色标本：标本量为５。虫体直径５０．０～６３．０μｍ，平均（５６．７±４．５）μｍ，附着盘直径４０．０～５３．０μｍ，平均（４５．５±５．５）μｍ，齿环直径２５．０～３０．０μｍ，平均（２６．１±２．６）μｍ，缘膜宽５．０～７．０μｍ，平均（５．６±０．６）μｍ，辐线数７～９条，齿体数１９～２４个，齿体纵长１２．５～１６．０μｍ，平均（１３．９±１．８）μｍ，齿钩长４．５～７．０μｍ，平均（５．３±１．４）μｍ，齿锥宽２．５～３．５μｍ，平均（３．２±０．２）μｍ，齿棘长５．０～６．０μｍ，平均（５．０±０．４）μｍ。口围绕度３９０°～４００°。吉姆萨染色标本：大核呈“Ｕ”形，外径约３３．０μｍ，内径与口径均约２３．０μｍ，未见小核。与Ｄｕｎｃａｎ［１８］所描述的异齿车轮虫比较，在齿体形态特征和统计数据上都比较吻合，故确定为异齿车轮虫。本种类寄生非常广泛，形态上又存在着很大变异性，本种类鉴定的最主要特征是具有与杜氏车轮虫类似的粗大齿体，但却无中央颗粒。黄黝鱼为本种的新宿主记录。

２．６　喙状车轮虫（Ｔ．ｒｏｓｔｒａｔａ）

采集时间及地点：２０１０年１０月和１１月，采自白洋淀。

宿主：麦穗鱼（Ｐｓｅｕｄｏｒａｓｂｏｒａ　ｐａｒｖａ）。

形态描述（图１ｈ；图２ｉ）：一种中型车轮虫，活体侧面观为圆盘状，干银染色标本显示其附着盘中央无明显颗粒物分布，齿钩较宽阔，前后缘较光滑，凸点超过Ｙ＋１轴，外切缘也较光滑但不与缘膜平行，骨突钝圆，具明显钩突，齿锥发达，前后齿体间嵌合紧密，顶点一般超过１／２ＹＹ－１轴，齿棘略弯曲，一般与Ｙ轴平行，具有棘突。干银染色标本：标本量为３２。虫体直径５０．０～６７．５μｍ，平均（６１．２±５．５）μｍ，附着盘直径４０．０～５７．５μｍ，平均（５０．０±４．７）μｍ，齿环直径２４．０～３５．０μｍ，平均（３０．６±４．５）μｍ，缘膜宽５．０～７．０μｍ，平均（５．６±０．４）μｍ，辐线数８～１０条；齿体数２１～２５个，齿体纵长１３．０～１７．５μｍ，平均（１６．５±１．５）μｍ，齿钩长５．０～７．５μｍ，平均（６．１±０．８）μｍ，齿锥宽２．０～４．０μｍ，平均（３．１±０．５）μｍ，齿棘长４．０～８．５μｍ，平均（７．０±０．９）μｍ。口围绕度３８０°～４１０°。

吉姆萨染色标本：大核呈马蹄型，未见小核。与Ｌｏｍ［１９］记录的种群相比较，形态结构和统计学数据极为吻合，故确定该种为喙状车轮虫。麦穗鱼是喙状车轮虫的新宿主记录。

２．７　卡氏车轮虫（Ｔ．ｋａｚｕｂｓｋｉ）

采集时间及地点：２０１０年６月和８月，采自白洋淀。

宿主：黄黝鱼、鲫鱼。

形态描述（图１ｉ；图２ｊ）：中型淡水车轮虫，活体侧面观为帽状。干银染色标本显示其附着盘中央无颗粒。齿钩较宽阔呈四边形。外切缘圆滑，与缘膜平行。前后缘都较圆滑，无钩突。齿钩凸点通常超过Ｙ＋１轴。骨突较尖锐。齿锥发达，圆滑的顶点紧密相嵌于下一齿体，通常不及ｌ／２ＹＹ－１。齿棘发达，笔直与Ｙ轴平行，未见棘突。干银染色标本：标本量为１２。虫体直径３５．０～５１．０μｍ，平均 （４３．７±２．７）μｍ，附着盘直径２８．０～４２．０μｍ，平均（３５．５±５．２）μｍ，齿环直径１７．０～２１．０μｍ，平均（１８．３±１．６）μｍ，缘膜宽３．０～５．０μｍ，平均（４．４±０．７）μｍ，辐线数７～９条，齿体数１９～２５个，齿体纵长８．０～１２．０μｍ，平均（１０．０±０．８）μｍ，齿钩长３．５～５．０μｍ，平均（４．１±０．２）μｍ，齿锥宽２．５μｍ，齿棘长３．０～４．５μｍ，平均（３．７±０．２）μｍ；口围绕度３９０°～４００°。

吉姆萨染色标本：大核呈马蹄形，外径约２７．０μｍ，内径与口径均约１７．０μｍ，未见小核。与Ｖａｎ等［１２］所描述的种类比较在齿体的形态特征上相吻合，统计数据也位于其描述的数据范围之内，故确定为异齿车轮虫。黄黝鱼为本种的新宿主记录。

２．８　短棘车轮虫（Ｔ．ｂｒｅｖｉｃｉｒｒａ）

采集时间及地点：２０１０年６月和１０月，采自白洋淀。

宿主：鲫鱼。

形态描述（图１ｊ；图２ｋ）：活体侧面观为帽状，干银染色标本显示其附着盘中央着色较均匀。齿钩呈四边形。齿钩外切缘较平直，与缘膜近平行。齿钩前后缘平直且相互平行。齿钩凸点超过Ｙ＋１轴，无钩突及后突起。齿锥发达，圆滑的顶点紧密嵌合于下一个齿体，大多数情况下顶点恰好到ｌ／２ＹＹ－ｌ轴。齿棘较短，顶点尖锐，与Ｙ轴平行或略向前倾，无棘突。干银染色标本：标本量为７。虫体直径３３．５～３９．０μｍ，平均（３５．８±４．７）μｍ，附着盘直径２６．０～３１．０μｍ，平均（２８．４±３．３）μｍ，齿环直径１４．０～１９．０μｍ，平均（１６．１±３．５）μｍ，缘膜宽３．０～４．０μｍ，平均（３．４±０．３）μｍ，辐线数７～１０条；齿体数１９～２３个，齿体纵长７．５～１１．５μｍ，平均（８．６±１．０）μｍ，齿钩长３．０～５．０μｍ，平均（３．４±０．３）μｍ，齿锥宽１．０～２．５μｍ，平均（１．９±０．４）μｍ，齿棘长３．０～４．５μｍ，平均（３．６±０．４）μｍ；口围绕度３８０°～４００°。

吉姆萨染色标本：无。与唐发辉［１３］报道的短棘车轮虫相比较，形态描述基本吻合，统计数据总体偏小，但是四边形的齿钩和短小的齿棘是本种区别与其他种类的一大特点，故仍将本种确定为短棘车轮虫。

２．９　适度车轮虫 （Ｔ．ｍｏｄｅｓｔａ）

采集时间及地点：２０１０年６月和１０月，采自白洋淀。

宿 主：鲫 鱼、圆 尾 斗 鱼 （Ｍａｃｒｏｐｏｄｕｓ　ｏｃｅｌ－ｌａｔｕｓ）。

形态描述（图１ｋ；图２ｌ）：一种寄主范围较广泛的中小型车轮虫，活体侧面观为盘状。干银染色标本显示其附着盘中央无明显颗粒存在。齿钩较宽阔、略呈四边形。前后缘较圆滑，外切缘较平滑与缘膜近平行。齿钩凸点与凹点基本处于同一水平线上，凸点均超过１／２ＹＹ＋１轴。无钩突。齿锥发达，顶点较尖锐，一般超过１／２ＹＹ－１轴，齿锥之间嵌合紧密。齿棘较纤细，一般与Ｙ轴平行或顶点略超过Ｙ轴。干银染色标本：标本量为３１。虫体直径２４．０～３１．０μｍ，平均 （２８．０±４．８）μｍ，附着盘直径１９．０～２６．５μｍ，平均（２３．４±５．１）μｍ，齿环直径１１．５～１７．５μｍ，平均（１４．９±３．６）μｍ，缘膜宽１．５～２．５μｍ，平均（２．３±０．１）μｍ，辐线数５～７条；齿体数１９～２３个，齿体纵长７．５～９．０μｍ，平均（８．２±０．６）μｍ，齿钩长２．５～３．０μｍ，齿锥宽１．５～３．０μｍ，平均（２．１±０．３）μｍ，齿棘长２．５～４．０μｍ，平均（３．１±０．３）μｍ；口围绕度３８０°～３９０°。

吉姆萨染色标本：大核呈马蹄型，外径约为２７．０μｍ，内径约为１６．０μｍ，口径为７．０μｍ，未见小核。与Ｌｏｍ［１９］描述的种类相比较，统计数据略小，除棘突不是特别明显外，其余形态特征基本吻合。与周杨等［２０］记录的种类相比较，除细胞核尺寸略小外，其余形态结构和统计学数据均较为一致，故确定该种为适度车轮虫。本种在鲫鱼和圆尾斗鱼上发现，两种鱼均为适度车轮虫的新宿主记录。

上述描述的有些种类直接通过干银染色照片等特征即可鉴定到种，故未进行吉姆萨染色。除以上９种车轮虫外，还有一部分银染标本因为缺乏足够的鉴定证据，暂未鉴定至种，关于白洋淀地区车轮虫属的分类鉴定工作还有待进一步完善和补充。

本研究对白洋淀鱼类鳃丝部位寄生的９种车轮虫进行了较为细致的描述和数据统计，并附以齿体定位图和银染照片。该研究是对白洋淀地区乃至华北地区车轮虫属首次细致的分类描述，研究结果将有助于阐明白洋淀鱼类寄生车轮虫区系组成，同时也可为我国其余地区的相关研究提供参考。